1. 研究目的与意义
内容:以公司的肿瘤细胞库为细胞来源,公司客户需检测新药为药物来源,通过体外实验的方式,测定药物的IC50值(the half maximal inhibitory concentration),从而确定抗癌药物对于癌细胞是否具有抑制作用。
意义:体外实验相比体内实验利用整个生物体进行实验,可实现物种特异性,更简单,更方便和更详细的分析。
活生物体是在由膜空间组织的环境中,由至少数万个基因、蛋白质分子、RNA分子、小有机化合物、无机离子和复合物组成的极其复杂的功能系统。
2. 文献综述
体外检测抗肿瘤药物对癌细胞的抑制作用文献综述陈慕丹【摘要】:以公司细胞库中可提供的细胞为受试细胞,以公司客户提供的药物或已上市的商品药物为药物来源,用CellTiter-Glo(CTG)在体外测定抗癌药物的对癌细胞的抑制作用,即以ATP生物发光法测定药物的IC50值(the half maximal inhibitory concentration),IC50值是用来衡量药物诱导细胞凋亡能力的值,诱导能力越强,该数值越低。
从而确定抗癌药物对于癌细胞是否具有抑制作用。
癌症不仅威胁着人类的健康,同时对国家来说,癌症是巨大的社会负担。
3. 设计方案和技术路线
方案:从公司的细胞库中选取特定细胞,以特定的生长状态及其要求复苏至相应的培养基中,以药物或细胞状态决定所传代数,使其长至一定数量,计数取适宜数量铺板,放置一天使其细胞状态稳定后,按照事先设计好的药物浓度梯度加药,加药后按照设置的时间测定药物的IC50值。
体外检测抗肿瘤药物对癌细胞的抑制--细胞选取、复苏、培养--铺板、加药、放置平衡--读数--数据处理即IC50值计算
4. 工作计划
2022.01.03 开始学习体外实验基本操作2022.01.032022.01.23 基本掌握体外IC50值测定方法(ATP法)2022.01.23 成功测得一组药物数据;基本掌握IC50分析方法2022.02.25 初步确定论文选题2022.02.2503.06 查找相应文献、分析正式确定选题;设计实验方式;正式开始论文实验操作2022.03.082022.04.30 完成论文实验操作部分2022.05.012022.05.20 完成论文写作
5. 难点与创新点
近年来,分子生物技术飞速发展,通过体外的方式可以更好的筛选出药物的有效性,及适宜的用药量等一系列的数据,为体内的进一步实验及临床用药提供可靠数据。
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