假孕大鼠黄体退化过程中MAPK成员表达研究开题报告

 2023-02-12 12:33:58

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

黄体是一种排卵后卵泡形成的短暂的内分泌器官,通过生物合成和分泌孕酮,在调节发情周期和维持妊娠中起着至关重要的作用。

在动物未受精、未着床或妊娠终止时,新的发情周期起始,卵泡继续发育并分泌雌激素,从而导致黄体经历功能和形态上的退化,因此黄体对发情周期的调控与妊娠的调节起重要作用。

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路是广泛存在于各种细胞中的一条信号转导途径,在细胞内以MAPKKK/MAPKK/MAPK为主干,再加上各种上游影响因子和下游作用底物,构成了一个功能多样、反应灵敏的信号转导网络。

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2. 研究的基本内容和问题

2.1研究目标本实验通过PGF处理不同时间诱导黄体退化以检测MAPK通路成员在黄体退化中的表达模式。

2.2研究内容和拟解决的关键问题本研究将联合应用PMSG和hCG诱导假孕大鼠模型,以PGF处理不同的时间以诱导黄体发生退化。

利用HE组织染色观察组织形态,WesternBlot技术检测MAPK成员的作用机制。

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3. 研究的方法与方案

3.1研究方法为了研究PGF诱导的大鼠黄体退化中MAPK成员的活性变化及其可能对黄体功能的调节,对28日龄SD大鼠注射一定剂量PMSG ,48 h后注射一定剂量的hCG(D0)建立假孕模型,D7注射一定量的前列腺素类似物氯前列烯醇或生理盐水,分别在0、10min、30min、1h、2h、4h采血并处死大鼠,收集卵巢。

一部分-80℃冻存,另一部分用多聚甲醛固定,常规石蜡切片。

运用HE组织染色观察组织形态,WesternBlot技术检测MAPK成员的表达。

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4. 研究创新点

多种实验表明MAPK信号通路在细胞生命活动中扮演着重要的角色,对动物受精和发育的研究工作有着重大意义。

本实验通过联合应用PMSG和hCG诱导假孕大鼠模型,采用WesternBlot技术检测MAPK通路成员的表达情况,对进一步探求黄体退化机制有着重要意义。

5. 研究计划与进展

本研究将从2013年11月开始至2014年5月结束。

(1)在2013年10月,进行实验的先期理论学习与准备。

(2)在2013年11月下旬,进行Western Blot技术的学习与训练。

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