1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
(1）课题意义
克氏原螯虾可供食用，生长快、肉味鲜美，生命力强，对环境的适应能力较强，是经济意义较大的一类甲壳动物。近年来,国内外对其消费需求量增长较快，其养殖业也随之得到了较快的发展[1] 。
卵黄蛋白是卵生动物胚胎及幼体发育的主要营养源，除提供蛋白及必需氨基酸外，还提供糖类、维生素、磷等多种营养物质，同时还有转运脂肪的功能。研究表明，虾类在孵化后48小时左右完全依赖卵黄蛋白的营养来维持生存和发育。卵黄蛋白的营养转化效率高，为幼体发育提供了关键的营养基础，卵黄蛋白还具备结合类胡萝卜素、核黄素以及钙、锌、镁等金属离子的能力，尤其是结合钙的能力与胚胎的发育有密切关系。卵黄蛋白除了具有营养和运输的功能外，一部分还具备免疫功能,一些卵黄蛋白还具备酶的功能，有些虾类的卵黄蛋白具备蛋白酶的部分功能。
2. 研究的基本内容和问题
1、研究目标
在克氏原螯虾的生产上，实现人工干预亲本繁殖与成熟，获取最大的经济效益。
2、研究内容：
3. 研究的方法与方案
1、研究方法
（1）RACE 技术克隆克氏原螯虾的卵黄蛋白基因的全长 cDNA 序列;
（2）实时定量 PCR 技术检测该基因在雌蟹各组织及性腺不同发育阶段中的表达情况。
4. 研究创新点
（1）运用了简单、快速、效果好的SMART TM RACE技术获取基因的序列。该方法基于PCR技术，步骤少，耗时短，且经济节省，只需知道mRNA内部很短的一段序列或一小段cDNA（如EST）即可用此法克隆出未知的序列。尤其对于低丰度基因的克隆优势更为显著
（2）使用实时荧光定量的方法，分析了克氏原螯虾卵黄蛋白原mRNA基因在卵巢发育的不同时期，卵巢和肝胰腺组织中的相对表达水平。选择敏感性和特异性较好的实验方法，在前人定性研究的基础上开始相对定量的研究，清晰地阐述了卵巢和肝胰腺中卵黄蛋白原mRNA 基因的表达差异。
5. 研究计划与进展
1进度安排
（1）2013.06-2013.07 查阅资料，拟定试验方案。
（2）2013.07-2013.09 进行正式试验。
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