1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
本课题意义:随着对抗氧化剂理论研究的不断深入,人们对于天然抗氧剂的开发越来越重视。
在近二十年的蓬勃发展中,天然抗氧化剂取得了巨大的进步,已从油脂和含脂食品的抗氧化剂发展成为体内氧自由基的清除剂,且已证明有保护人体细胞组织及动物健康生长等生理作用[1]。
而迷迭香酸作为一种常用的天然抗氧化剂,具有抗氧化、抗菌、抗病毒、抗炎和免疫调节等活性,其广泛应用于食品、医药中,而且在自然界中分布广泛,原料容易获取,因此近年来越来越受到人们的关注。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标:1.学习细胞的培养,显微镜观察细胞形态结构2.研究迷迭香酸的抗氧化活性3.学会使用常规实验仪器的基本操作研究内容:1.细胞的培养与形态结构的观察2.迷迭香酸在细胞外抗氧化性能检测3.迷迭香酸在细胞内活性检测拟解决的关键问题:1.探索迷迭香酸对肝细胞的抗氧化性能
3. 研究的方法与方案
研究方法、方案:一、试剂与器材1.试剂:迷迭香酸、培养基、PBS、TBST、试剂盒(SOD、GSH-PX、MDA)TBST、DPPH2.器材:培养箱、移液枪(200、1000)、酶标仪、离心管(1.5mL、2mL、15mL、50mL)酶标板。
二、试验方法1.样品的抗氧化活性1.1 ABTS检测将0.2mL的7.4mmol/L ABTS溶液与0.2mL的2.6mmol/L K2S2O8溶液分别加入试管中混合,在黑暗、室温条件下放置12小时,取出后用pH7.4的磷酸盐缓冲液稀释40-50倍。
于734nm波长测吸光值,配成ABTS 工作液。
4. 研究创新点
该试验方法跟常规方法相比,操作简便、自由基引发剂无害、反应终点明显易到达、仪器成本低、易重复等
5. 研究计划与进展
1)2017年2月初到2月下旬查阅相关文献,确立研究方向及内容。
预期:通过查阅文献,和老师的指导,顺利确定课题。
2)2017年2月到2017年4月细胞培养和传代、冻存复苏,抗氧化活性检测,并进行相关实验操作。
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