1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
研究显示，在大多数哺乳动物体内，大约有70%-99.9%的卵泡在排卵前就发生卵泡闭锁，只有少数卵泡细胞最终能够进行排卵。研究表明，在卵泡发生闭锁的过程中，卵巢颗粒细胞的形态结构也产生相应变化：卵巢颗粒细胞核固缩，细胞质内出现空腔，颗粒细胞与周围组织分离脱落，分解形成闭锁小体，颗粒细胞凋亡。随着深入研究发现，颗粒细胞凋亡现象的发生早于卵泡闭锁，并进一步证实卵泡闭锁是由于颗粒细胞发生凋亡[1]。因此，探索颗粒细胞凋亡的作用机制对于解决哺乳动物排卵问题有着相当重要的意义。
细胞凋亡是在多基因调控下的细胞自动结束生命的过程，受到多种蛋白因子的调控作用。Siva是近年来发现的促凋亡蛋白家族，其最初是通过酵母双杂交技术克隆得到的一段的cDNA序列， Siva-1是凋亡调节因子Siva编码的选择性剪接体之一,由氨基酸残基组成。在Siva-1的羧基末端富含半胱氨酸残基，却缺乏组氨酸残基，因此形成了B形盒状和锌指样结构，该特殊结构使得Siva-1呈现为一种新的金属结合模体，可结合于CD27的胞质尾区，发挥诱导细胞凋亡的特性[2]。
随着进一步的研究，我们发现Siva-1不仅能够作用于CD27所介导的细胞凋亡，还可作用于多条细胞凋亡通路，如可以参与p53引起的细胞凋亡[3]，抑制Bcl-2/Bcl-xL的抑凋亡功能[4]；在参与其他多种细胞凋亡通路同时，Siva-1还可以抑制NF-kappaB的活性[5]，并且可以通过与非受体酪氨酸激酶c-Abl相互作用来诱导细胞凋亡[6]。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标：探索Siva-1在猪卵巢颗粒细胞凋亡中的作用
研究内容: 1.Siva-1敲减对猪卵巢颗粒细胞中Siva-1基因表达的影响
2.Siva-1敲减对猪卵巢颗粒细胞凋亡率的影响
3. 研究的方法与方案
研究方法：
（一）引物设计与合成
根据Genbank中收录的相应的mRNA基因序列，采用Primer Premier 5.0软件设计引物，用于PCR 分析，以及Bax基因，Bcl-2基因和 GAPDH 基因的定量分析。引物序列信息和扩增条件见图1。
4. 研究创新点
初步了解Siva-1基因在猪卵巢颗粒细胞中的作用
5. 研究计划与进展
2016.4-2016.6 查阅文献资料、熟悉实验操作
2016.7-2016.9 实验设计、实验材料的准备
2016.10-2017.2 实验数据、各项指标的测定
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