1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)
研究意义及应用前景
禽流感病毒(avian influenza viruses,AIVs),属于甲型流感病毒,是一种能够引起禽鸟间传播的传染病,常见于鸡,鸭和鹅等禽类。禽流感病毒在野禽和家禽间可引起低、中、高三种程度的感染,但大多数情况下症状并不明显,该病毒通常不易感染人类[1]。
野生禽类是禽流感病毒主要的自然宿主[2],可作为病毒研究的基因库,为我们提供病毒遗传多样性的研究数据。感染了AIVs的禽类能够在无明显症状的情况下进行长时间迁移[3],通过间接污染水体环境或者相互之间直接接触达到传播禽流感病毒的目的[4]。
2. 研究的基本内容和问题
研究目标
采用Real-Time PCR方法检测所采样本感染的禽流感病毒情况,使用琼脂糖凝胶电泳对检测到的病毒进行分型判断是否有H3亚型的存在及具体存在情况。
研究内容
3. 研究的方法与方案
研究方法及实验方案
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研究样本采集
在南京市区活禽交易市场随机采集,在盐城保护区采集被非法抓捕没收的野生禽类样本。将拭子蘸取病毒保存液湿润,插入咽喉深处或泄殖腔内约2~3cm深,缓慢旋转三圈,停留数秒,轻轻拔出拭子,分别装入有病毒保存液的采样管中,封好标号记录。样本全程冷藏,并于4小时内转移至实验室,于-80℃冻存,用于后续实验。
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禽流感病毒的H3亚型传统意义上是低致病性的禽流感病毒,因而对于H3亚型的监测与研究的资料相对较少。但近些年因为人为的跨地域大型运输贩售禽类,使得H3亚型毒株与H7类高致病性毒株有病毒重组的机会出现,加强了H3亚型的致病力,也对我们自身安全造成隐患。本研究针对H3亚型进行检测,能够为日后的新型禽流感毒株和出现和预防提供可靠的数据资料。
5. 研究计划与进展
2018.8-2018.9:采集样本,编号记录,对样本进行前期处理工作。
2018.10-2018.11:进行病毒鸡胚接种,收集有血凝价的鸡胚尿囊液,统一于-80℃冰箱中冻存。记录数据制作初始表格。
2018.12-2019.1:进行RT-PCR与病毒亚型鉴定,挑选其中H3亚型待进一步检验。
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