1. 研究目的与意义
研究背景：抗生素是治疗感染性疾病的常用药物, 1929年英国学者Flemming首先发现了青霉素, 1941年应用于临床。抗生素是20世纪最伟大的医学发现,它使人类的平均寿命至少延长了10年。抗生素是由某种微生物所产生的,在低浓度下对别种微生物有抑制或杀伤的药物抗生素的作用范围广,对细菌、病毒、真菌甚至肿瘤都可起到抑制或杀伤作用。随着抗生素在疾病治疗领域中的使用，人们对抗生素的需求越来越多，以及在科研过程中人为赋予微生物的抗性，使得抗性微生物在土壤中的含量以及种类越来越广泛。抗微生物药物耐药性（AMR）是对全球公共卫生的严重威胁，农业和土壤环境充当抗微生物药物耐药性基因（AR？G）库，作为不同生态系统之间的纽带，使抗性基因能够混合和传播。由于人类与农业环境之间的密切相互作用，这些AMR基因库对人类和动物健康都是主要风险。细菌耐药性的持续增加已经对生态环境产生了不同程度的危害，大多数菌株对新霉素、多粘菌素B、链霉素、卡那霉素、氯霉素和万古霉素都已存在抗性;对青霉素、红霉素和利福平敏感;对四环素、庆大霉素和环丙沙星的抗性随着菌种的不同而存在差异。卡那霉素是氨基糖苷类(aminoglycoside,AGs)抗生素的典型代表,该类型抗生素常见的还有链霉素、庆大霉素、新霉素、巴龙霉素、大观霉素、妥布霉素、核糖霉素、奈替米星、阿米卡星、异帕米星、小诺米星和依替米星等,是由氨基糖与氨基环己醇通过氧桥糖苷键连接而成的糖苷类抗生素药物。这类抗生素由于价格经济、杀菌高效以及可与β-内酰胺类抗生素联合应用等诸多优势,不仅在临床上使用广泛,而且也是目前我国农业、畜牧业和水产业中常用的兽药之一,除了用于养殖动物的治疗外还常被当作促生长因子添加到饲料中促进动物的生长。这类抗生素性质非常稳定不容易降解,且具有耳毒性和肾毒性,在环境中的残留一方面会诱发抗生素抗性基因的产生,加速其传播和扩散;另一方面可通过食物链进入人体从而危害人类健康。
目的和意义:土壤原生生物是调节土壤微生物群落的关键。然而，我们对土壤原生生物在塑造抗生素耐药性组中的作用的理解是有限的。为了弄清楚苏州科技大学校园内不同区域中对卡那霉素抗性微生物的种类级数量，本实验进行相关的研究。主要获取不同生态环境下土壤对微生物抗性的影响。通过对土壤中抗性基因的研究,可以明确抗性基因在土壤生物中的分布及其传递,分析抗性基因食物链传递的风险及其规律,从而为控制抗性基因污染提供理论依据,保障人类健康。同时,其对于维护星球健康也具有重要的价值。期望加强卡那霉素素对土壤污染的研究，关注由此引发的生态问题，为卡那霉素的使用、规划、管控等提供有效依据。
2. 研究内容和预期目标
研究内容
卡那霉素目前在医疗业、农业和畜牧业上的广泛运用，致使微生物产生了抗生素抗性，在此基础上对校园土壤微生物的抗生素抗性菌进行筛选，本实验研究选择的是卡那霉素，具体研究在土壤微生物中哪些菌群对于卡那霉素素具有抗性，并将其进行筛选纯化，后通过PCR测序对其进行分析，并查阅相关文献对筛选出的菌群进行整理归纳。
预期目标
3. 研究的方法与步骤
一、实验材料
材料：校园土样
试剂：卡那霉素，胰蛋白胨，酵母提取物，氯化钠，少量的1mol/LNaOH，琼脂粉，蒸馏水
4. 参考文献
[1]蔡天贵.大熊猫肠道微生物、栖息地土壤微生物和主食竹中的抗生素抗性研究.西华师范大学，2023年2月
[2]武凤霞、张淑彬、刘建斌.中国土壤微塑料污染现状及其对土壤微生物的影响.中南农业科技.2022，43
[3]施李鸣等.武夷菌素对土壤微生物群落及抗生素抗性基因的影响.基因组学与应用生物学.2020，39.
5. 计划与进度安排
（1）2024-2024-1学期17-20周~2024-2024-2学期第1周~第2周，查阅资料，准备开题报告，外文论文翻译；
（2）第3周~第6周（2024-3-13~3-31），选择土壤样本，进行初步实验；
（3）第7周~第11周（2024-4-2~5-3），研究不同区域中土壤微生物抗性的状况，分析不同土壤中微生物分布情况的差异性，以及鉴定土壤抗性微生物的种类等
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