胆碱对团头鲂脂肪代谢的影响开题报告

 2023-02-12 12:34:11

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

团头鲂(Megalobramaamblycephala),原产湖北省武昌县,俗称武昌鱼、鳊鱼,隶属鲤形目,鲤科,鳊亚科,鲂属。我国的鳊鱼类分为2个属,即鲂属和鳊属,3个种,即长春鳊、三角鲂和团头鲂。团头鲂是我国重要的草食性经济鱼类之一,由于其食性广、成本低、生长快、成活率高、易捕捞,能在池塘中产卵繁殖,且具有味美、头小、含肉率高、体形好、规格适中等优点,因而被作为优良的草食性鱼类品种在全国普遍推广。近20年来,江苏、浙江、上海、安徽、山东、河南、河北、湖南、江西等20余个省、市、自治区引进养殖了团头鲂,目前团头鲂在南方地区产量约占总产量10%以上,成为我国池塘、网箱养殖的主要品种,经济效益非常显著。

近年来我国集约化水产养殖业发展迅猛,与此同时也暴露出一个严峻的问题:对水产动物营养、生理、病理和生态等方面的基础理论和应用技术研究明显滞后于产业发展。由于缺乏充分的科技支撑,以致生产中经常出现强化投饲、滥施药物、饲料营养组成不平衡,添加变质(如酸败油脂和霉变原料)饲料以及农药、工业三废对水体污染等诸多问题,造成水产动物病害频繁发生,其中以损伤肝脏和诱发肝脏病变为特征的疾病危害甚大。而肝脏是鱼体内最主要的代谢器官,对鱼类的健康生长起着不可替代的作用,脂肪损伤或病变往往导致水产动物机体代谢机能紊乱和抗病力降低,极易造成继发传染性疾病的暴发和综合症的肆虐,严重威胁着集约化水产养殖业的持续健康发展。鱼类肝脏病变中最常见和最主要的表现形式是脂肪在肝脏中得大量甚至过量沉积,形成脂肪肝,且以营养型脂肪肝为甚,已经引起水产科技工作者和养殖者的广泛关注。

当前集约化养殖鱼类的脂肪肝现象严重,而现有关于鱼类抗脂肪肝物质的研究主要是对少数几种养殖鱼类,尤其是海水鱼进行,国内的研究主要是以鲫鱼和草鱼为对象,对团头鲂的研究很少。

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2. 研究的基本内容和问题

通过对胆碱的抗脂肪肝作用研究,可以对其他一些抗脂肪肝物质的作用提供研究的基础和资料,也可以通过了解其作用机制,寻找筛选更高效的抗脂肪肝物质,并且可以为团头鲂以及其他鱼类养殖生产中的脂肪肝疾病提供有效的防治方法。

本实验主要分三个内容:

试验一、不同的脂肪和胆碱水平对团头鲂鱼种生长性能、全鱼体组成、肌肉成分及肠道消化酶的影响。

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3. 研究的方法与方案

选择健康、规格、重量基本一致,来自浦口实验基地的团头鲂,体重(470.8)g。试验在南京农业大学水产动物营养与生态学研究室进行,将实验鱼随机分为4组,每组设3个平行试验,每平行10尾试验鱼。养殖系统为室内可控温循环水系统,实验用16个水族箱,每个水族箱(1000L)为一个平行。

在实验前,进行适应性驯养7d,正试期60天。团头鲂实验开始后每天8:00、12:00、16:00分3次投喂。投喂时记录投喂量,30mim后观察并记录摄食情况,并且每天9:00和13:00各测1次水温。水源为曝气后的自来水,每天换水一次,实验期间保持水体PH 7.5~8.0、溶养> 5.0mg/L、氨氮< 0.4mg/L、亚硝态氮< 0.06 mg /L、总氮< 1.5 mg /L、总磷< 0.8 mg /L,以保证水质优良。

正试期结束后,禁食24h,将每个水族箱内的每尾鱼称体重后用注射器尾静脉采血。采集的血液置于预先制好的肝素抗凝管中,于4℃下3500~4000r/min离心10min,收集血清,标好后分装于-20℃保存备用。将采血后的鱼首先剖开腹腔,取出整个内脏团称重,剥离肝胰脏再称重,在每组选取较好的肝脏放人固定液中,用于HE染色切片以及电镜观察,其他的放入离心管于-20℃保存备用;另取肝脏,放入离心管中-20℃保存,在测定肝脏生化指标前需要匀浆,2500~3000r/min离心10min,取上清备用。从内脏团中将肠分离开,冲洗干净后放入离心管于-20℃保存备用;将腹腔中得内脏团剥离后称空壳重:最后去鳞,取侧线以上的中间部分的背肌,去皮去骨后装袋于-20℃保存备用。

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4. 研究创新点

已有的研究表明胆碱可作为一种抗脂肪肝物质,在畜禽上已被证明能够减少肝脏脂肪沉积,并具有促进生长的作用,因此得以广泛应用。在鱼类上基本限于胆碱的需要量研究,而胆碱对于鱼类的生理以及组织病理学方面的影响研究很少。因此本实验通过对团头鲂生长性能、生理状态(包括抗氧化、非特意性免疫机能)以及病理组织学(肝脏组织切片HE染色考察脂肪变性状况、透射电镜观察肝脏细胞超微结构),进一步研究添加胆碱对于高脂饲喂的团头鲂的影响,为今后研究胆碱对鱼类作用机制的研究提供数据和基础。

5. 研究计划与进展

养殖试验(7月26日~9月22日)

样品采集(9月23)

实验室试验(9月24日-11月30日)

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