1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
热应激是指在高环境温度中的机体对热环境所做的非特异性的生理反应的总和 [1,2]。随着全球变暖，热应激已成为危害畜牧生产的重要因素之一。研究表明奶牛夏季高温应激是引起泌乳奶牛夏季繁殖性能下降的一个重要原因。研究发现奶牛在夏季，其受孕率一般会从较冷月份的40~60%下降到10~20％或更低（Cavestany等, 1985），低的繁殖率对奶牛生产造成重大的经济损失[1]。目前虽然大多数奶牛养殖场都已经广泛使用了现代化的降温系统，但在夏季无论怎样给奶牛降温都无法实现其在冬季的受孕率，降温只能部分缓解高温应激对繁殖的影响。
在过去的十多年中，研究人员分别从卵母细胞发育、卵泡波动力学、卵泡类固醇合成能力等方面研究了热应激对奶牛繁殖的影响，研究发现热应激可抑制奶牛的卵泡发育，从而导致奶牛夏季繁殖性能下降 [2-4]。在卵泡发育过程中，卵泡颗粒细胞（granulosa cells，GCs）发挥重要的功能，其可以合成雌激素、孕激素，同时其还可通过发生凋亡对卵泡的发育分化起重要作用，所以在卵泡发育过程中对卵泡颗粒细胞的研究一直是研究的焦点。研究发现，高温会引起猪、小鼠卵泡颗粒细胞发生凋亡，并抑制促性腺激素受体水平[5,6]。对牛卵泡颗粒细胞体外培养的研究发现，38.5℃的高温就会引起颗粒细胞发生凋亡 [7]。其中在应激诱导的细胞凋亡的研究中，血红素加氧酶1 （hemeoxygenase-1，HO-1）越来越被人们所重视。HO-1是一种最广泛存在的抗氧化防御酶，又称为热休克蛋白32（HSP32），其能被热诱导产生。近十年来的研究表明，在应激条件下，HO-1作为一种细胞保护的酶来发挥作用，并且越来越多的研究阐明了HO-1的抗凋亡及细胞保护的作用 [8-11]。但迄今为止，HO-1调控卵巢细胞凋亡的潜在机制尚需进一步的研究。
在畜牧生产中，环境因素尤其是环境高温会影响奶牛卵泡的发育。研究高温条件下HO-1卵泡颗粒细胞凋亡调控作用机制对于畜牧生产具有重要的应用意义。本研究将对体外培养的卵巢颗粒细胞进行高温处理，研究高温条件下HO-1表达的变化。本实验结果可为热应激引起奶牛繁殖力下降的诱因和机制提供理论支持。
2. 研究的基本内容和问题
2.研究的目标、内容和拟解决的关键问题
2.1 研究目标：
1) 分离培养奶牛卵巢颗粒细胞；
3. 研究的方法与方案
3.研究方法、技术路线、实验方案及可行性分析
3.1 拟采取的研究方法
1) 奶牛卵巢颗粒细胞培养：外科手术法釆取卵巢组织，进行原代培养。
4. 研究创新点
4.特色或创新之处
从细胞水平，探讨热对卵巢颗粒细胞HO-1表达的影响。
5. 研究计划与进展
5.项目研究计划及预期进展
1）2016年9月初到9月下旬 查阅相关文献，确立研究方向及内容。
预期:通过查阅文献，和老师的指导，顺利确定课题。
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