1. 研究目的与意义
毕业设计内容：1、双氢青蒿素对HSC增殖作用的影响；2、双氢青蒿素对HSC凋亡的作用；此项目研究的意义：青蒿素（Artemisinin）是我国药学工作者从菊科植物黄花蒿叶中提取分离到的一种具有过氧桥的倍半萜内酯类化合物，其化学结构经过改造、修饰，合成了青蒿琥酯、蒿甲醚、双氢青蒿素（Dihydroartemisinin，DHA）等多种衍生物。
DHA也是青蒿素及其衍生物蒿甲醚和青蒿琥酯在体内的有效活性代谢产物，其进入体内后具有吸收好、分布广、排泄和代谢迅速等特点，其分子式是C15H24O5，分子量为284.3481。
我们前期拟通过MTT研究双氢青蒿素对HSC细胞增殖活性的影响。
2. 文献综述
双氢青蒿素抗肿瘤机制的研究进展高颖 南京中医药大学翰林学院130203302摘要：双氢青蒿素(dihydroartemisinin，DHA)是我们合成的一种青蒿素衍生物类抗疟药，它不仅具有较好的抗疟作用，在体内外还具有较强的抗肿瘤作用。
现代研究表明，DHA可以作用于线粒体依赖性细胞凋亡通路、抑制NF-KB活化，从而促进肿瘤细胞凋亡；并阻滞细胞周期；由Fe2 介导直接杀伤肿瘤细胞；通过作用于纤维蛋白溶解系统uPA、抑制VEGF诱导的血管生成作用来抑制肿瘤的侵袭和转移。
本综述对DHA抗肿瘤作用及其机制方面的研究作一阐述，以及对青蒿素类药物抗癌作用研究热点提供有价值的参考。
3. 设计方案和技术路线
研究方案1、利用MTT法观察双氢青蒿素对HSC增殖的抑制作用；2、利用LDH法观察DHA对HSC的毒性作用:；3、应用AST、ALT试剂盒检测DHA对HSC上清液的影响；4、应用流式细胞仪检测DHA对HSC周期的影响；5、应用Western blotting分析双氢青蒿素对细胞周期调控蛋白p21和p27表达的影响；6、应用Hoechst33258染色检测DHA对HSC的凋亡率；7、应用Western blotting技术分析药物对Bcl-2、Bax、细胞色素c、caspase-3、-8、-9等蛋白表达的影响。
研究方案1、利用MTT法观察双氢青蒿素对HSC增殖的抑制作用；2、利用LDH法观察DHA对HSC的毒性作用:；3、应用AST、ALT试剂盒检测DHA对HSC上清液的影响；4、应用流式细胞仪检测DHA对HSC周期的影响；5、应用Western blotting分析双氢青蒿素对细胞周期调控蛋白p21和p27表达的影响；6、应用Hoechst33258染色检测DHA对HSC的凋亡率；7、应用Western blotting技术分析药物对Bcl-2、Bax、细胞色素c、caspase-3、-8、-9等蛋白表达的影响。
技术路线
4. 工作计划
2022.12022.2查阅资料，初步拟定实验方案2022.32022.5完成实验内容2022.52013.6处理实验数据及整理毕业论文
5. 难点与创新点
项目特色：目前临床缺少抗肝纤维化有效的治疗药物。
因此研制出安全、有效、经济的抗肝纤维化药物对我们而言具有重要的社会意义与经济效益。
本实验项目思路设计清晰明朗，实验设计通过western blotting、流式细胞仪、PCR仪等方法在体外检测药物对HSC细胞增殖及凋亡相关蛋白的影响，初步确认并阐明药物在体外对HSC活性的抑制作用机制。
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