1. 研究目的与意义
内容:1.B7-H4结构特点及功能表达 2.B7-H4在多种临床疾病上的作用3.B7-H4的前景展望意义:在2003年,在B7家族里发现了B7-H4这个新成员,B7-H4又叫B7x或B7sl。
共刺激分子B7家族,属于免疫球蛋白超家族,在肿瘤的诊断和治疗中B7家族成员的潜在作用越来越突出。
B7家族新成员B7-H4是负监管因素的T淋巴细胞免疫反应,抑制细胞因子的生成,T细胞增殖和细胞周期的过程,与肿瘤的发生发展有重要关系,近年来临床上运用B7-H4在肿瘤诊断和治疗,妇科肿瘤、前列腺癌、肾病、糖尿病、移植免疫等研究进展取得了许多新突破。
2. 文献综述
文献综述:B7-H4mfc的表达与构建 摘要: B7-H4 是 2003 年发现的 B7 家族成员, 在 T 细胞介导的免疫中起负调节作用, 抑制T 细胞增殖和细胞因子分泌。
B7-H4家族作为B7家族(家族成员20%-40%蛋白质相同)的负向调节分子,它的发现扩展了人们对细胞介导的免疫应答和耐受调控机制的理解 。
管其 mRNA 在淋巴组织和非淋巴组织均有表达, 但其蛋白质在正常组织、细胞中不表达或极低表达。
3. 设计方案和技术路线
研究方案:1.质粒的构建(设计引物-PCR扩增)2. B7-H4抗体的表达和鉴定3. B7-H4抗体的纯化4. B7-H4抗体的检测技术路线:培养细胞→细胞转染、表达→收集细胞上清→蛋白纯化→跑SDS聚丙烯胺凝胶电泳鉴定蛋白→HPLC高效液相鉴定蛋白纯度。
4. 工作计划
2022年1~2月查阅B7-H4的相关文献201 8年2~3月根据文献提示和指导老师的指导,完成实验路线的设计2022年4~6月根据实验路线完成实验
5. 难点与创新点
B7-H4能抑制 T 细胞增殖、细胞因子产生和细胞周期的进行,从而抑制 T 细胞介导的免疫应答 从而B7-H4 在肿瘤免疫应答中起重要作用。
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