1. 研究目的与意义
本实验主要研究内容:1、猫豆的非左旋多巴成分的提取分离;2、猫豆的非左旋多巴(各部分萃取物)成分对NG108-15细胞增殖的作用。
研究意义:1、猫豆的非左旋多巴成分研究为猫豆的化学成分研究提供数据支撑,有利于药典数据的完善;2、为猫豆的非左旋多巴成分的药理作用、以及其对左旋多巴的主要药效是否有影响提供一定的科学证明;3、有利于猫豆的药效开发,进一步发掘其药效。
本次研究将开创国内对猫豆深入研究的先例,为今后研究工作者提供充分的数据参考。
2. 文献综述
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3. 设计方案和技术路线
研究方案:(1)猫豆打碎,采用95%乙醇回流提取法,获得乙醇提取物,再用系统溶剂法萃取,分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物;(2)NG108-15细胞的培养液为10% FBS 1% HAT DMEM,置于37℃,5%CO2培养箱中培养,1 ~ 2天更换1次培养液,每天观察细胞状态,保证细胞状态良好 (3)取对数生长期的NG-108细胞,倒置显微镜下观察状态良好,设五组(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、左旋多巴对照和空白组),7个不同浓度,采用MTT法直接给药,最后在570nm波长处测量OD值,计算、分析、比较。
技术路线:
4. 工作计划
本课题拟在半年内完成,具体时间安排为:第一阶段:2022.12-2022.1 主要查阅资料与实验方案设计;第二阶段:2022.2-~2022.3 猫豆化学成分的提取萃取;第三阶段:2022.2~2022.3 初步进行预实验;第四阶段:2022.3~2022.5 根据预实验情况确定最终实验方案进行正式实验,检测收集数据 。
第五阶段:2022.5进行数据处理,分析讨论得出结论,总结课题,撰写论文、毕业论文答辩。
5. 难点与创新点
本课题首次对猫豆非左旋多巴成分进行系统研究分析,首次对其进行NG108-15细胞活性研究,为猫豆的非左旋多巴成分药理作用研究提供参考,另外本实验以左旋多巴为对照,更加充分体现出猫豆非左旋多巴成分对左旋多巴药理活性的影响,进一步探讨猫豆非左旋多巴成分的药用价值。
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