1. 研究目的与意义、国内外研究现状（文献综述）
过氧化物酶是广泛存在于动物、植物和微生物体中，参与各种生物合成和降解功能的一类含血红素的氧化酶，其生物学功能是通过携带电子到各种分子供体催化还原H2O2来调节生物体内活性氧的平衡[1]。
它是植物体内有效清除活性氧的关键酶之一，在植物生长和发育中参与了多种生理活动，尤其在植物应对逆境损伤时起着非常重要的作用。
[2-3]植物中各种过氧化物酶在结构折叠上存在很多共性，也存在一些特异性，基于序列的差异和催化特性的不同，可以分为3类：第1类是存在于细菌的ClassⅠ型，第2类是存在于真菌细胞外的ClassⅡ型，第3类是Class Ⅲ 型分泌性过氧化物酶（Class Ⅲ peroxidases，Prxs，EC 1.11.1.7），它属典型的植物分泌性过氧化物酶（peroxidase，POD），包含许多分泌型植物过氧化物酶，存在于山葵、大麦和大豆、茶树等植物中[4]，也是研究得最广泛的一种类型[5]对茶树POD研究起始于19世纪末20世纪初，大部分研究首先要得到POD，一般有两种途径，一种是从茶树提取粗酶，得到单一的酶源比较困难[6]，首先，它与其他的物质很难完全的分离开；POD由多个基因编码，多则可达130多个。
2. 研究的基本内容和问题
本研究是通过克隆得到POD基因家族中的两个POD基因，而后进行生物信息学分析对比其差异，预测对应功能及作用机理。
3. 研究的方法与方案
茶树转录组 获得POD3，POD55的序列克隆CsPOD3，CsPOD55生物信息学分析氨基酸进化 氨基酸 亲疏水性 跨膜区 信号肽 磷酸化亚细胞 二级和三级序列比分析 组成及 分析 域结构 预测与 位点预定位预 结构预测与理化性 预测 分析测与分测分析质分析析1 基因克隆1.1 茶树叶片总 RNA 提取RNA提取使用北京华越洋生物超快新型植物RNA提取试剂盒。
a.新鲜植物组织50-100mg样品经液氮冷冻后研磨成粉状，加入1ml细胞裂解液充分混合。
b.吸取1ml匀浆转入2ml离心管中，加入300μl去蛋白液和200μl氯仿，充分震荡30秒。
4. 研究创新点
过氧化物酶（POD）作为植物抗逆性生理评价的重要指标之一，对茶树优异资源挖掘、利用和保护都有着重要意义。
本研究首先由克隆得到POD基因家族中的两个POD基因，通过进行生物信息学分析对比其差异，为后续深入了解 POD 的功能及调控机制研究奠定了基础。
5. 研究计划与进展
（一） 实验计划周期：2017年6月-2018年5月（二） 准备阶段：2017年6月-2017年3月查阅资料及做好相关的实验准备（三） 实验阶段：2018年3月：查阅相关文献并进行试验准备2018年4月：进行预试验，克隆基因2018年5月：实验数据整理及文论撰写，修改论文，定稿，答辩
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