黄酮3-O-糖苷衍生物的高效生物转化制备研究开题报告

 2022-12-26 23:10:34

1. 研究目的与意义

探究黄酮3-O-糖苷衍生物的高效生物转化制备流程,以及对其既有方案进行探索及优化。

探究由将廉价的槲皮素转化为更有价值的异槲皮苷、金丝桃苷或其新型糖苷衍生物的思路。

槲皮素是在我国中医临床上常用的一种祛痰药,具有较好的祛痰、止咳效应,也有一定的平喘作用,并有降低血压、提高毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉、增加冠状动脉血流量的药理功能,更具有抗氧化,抑制促癌剂的作用。

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2. 文献综述

详见附件

3. 设计方案和技术路线

1.材料与仪器细菌材料:ZSP01菌试剂材料:二氢槲皮素(98%);各种浓度的甲醇,乙酸,超纯水,二甲亚砜(DMSO);细菌所需营养物质:胰蛋白胨、酵母膏、氯化钠、琼脂、蔗糖、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氢氧化钠.仪器材料:锥形瓶,电子天平,旋转蒸发仪,大孔树脂AB-8,冰柜, 超净台、生化培养箱、培养皿、恒温鼓风干燥箱、UPLC、紫外分光光度计.2.实验方法2.1菌液培养与产物的获取① 菌种转接置于30℃恒温培养12h② 菌种活化 摇床培养13~15h180rpm/min 30℃③ 菌液培养 摇床培养10~12h180rpm/min 30℃④ 二氢槲皮素 0.5g DMSO8%ph=4磷酸缓冲液100ml 菌液100ml⑤ 发酵期间取点(12h、24h、48h),利用UPLC测得发酵转化趋势⑥ 大孔树脂(AB-8)层析柱200ml柱体积 五倍柱体积酸水冲至无醇味 ⑦ 上样吸附 五倍柱体积酸水冲洗去杂质⑧ 配制不同浓度的甲醇甲醇溶液进行梯度洗脱⑨ 旋蒸至无甲醇⑩ 冷冻干燥得纯品2.2产物的性质研究运用UPLC与MS,测定推测产物的性质,结构。

以此为依据,对生产路线进行评价和改进。

4. 工作计划

1.03-2.27 查阅并整理文献资料2.27-3.15 完成开题报告3.15-5.31 进行课题实验5.1-5.30完成毕业论文设计

5. 难点与创新点

槲皮素是在我国中医临床上常用的一种祛痰药,具有较好的祛痰、止咳效应,也有一定的平喘作用,并有降低血压、提高毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉、增加冠状动脉血流量的药理功能,更具有抗氧化,抑制促癌剂的作用。

不同于传统的化学合成,本实验采用生物转化的方式,通过微生物发酵转化,使得槲皮素在其糖基化的基础上,通过发酵调控,激活菌株ZSP01中的琥珀酰转移酶,可进一步获得一种新型的槲皮素琥珀糖苷衍生物,更具研究与经济价值。

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