1. 研究目的与意义
【研究内容】
1.以HaCaT细胞为模型,采用MTT法,以细胞存活率为指标,观察大蒜素DATS是否可以逆转盐酸厄洛替尼所致细胞损伤。
2.盐酸厄洛替尼所致皮疹动物模型的建立及大蒜素DATS的抗皮疹作用。
2. 文献综述
大蒜素对厄洛替尼致皮疹的防治作用
摘 要:大蒜素具有抗菌、抗炎、抗肿瘤、抑制血小板聚集、降血压等药理作用,在体内、体外都呈现了明显的抑制肿瘤生长的作用,现代的一些研究发现,大蒜中的化合物可以影响炎症的很多环节,并能够调节T细胞、巨噬细胞等炎症细胞的活性,这提示大蒜素可能在治疗EGFR抑制剂所致皮疹方面存在一定的防治作用。
3. 设计方案和技术路线
【研究方案】
1.以HaCaT细胞为模型,采用MTT法,以细胞存活率为指标,观察大蒜素是否可以逆转盐酸厄洛替尼所致细胞损伤。
2块96孔板(大蒜素24h和48h),每块板子包括12组(11列),每组设置5个复孔,分别为调零组(1列,不含细胞,加100μL不完全培养基),空白对照组(1列,加100μL细胞悬液),给药组(10列,加100μL细胞悬液,待细胞贴壁后,1列加99μL4μM(24h,48h加99μL 0.4μM)盐酸厄洛替尼和1μL不完全培养基(盐酸厄洛替尼组,终浓度为4μM),5列分别加1μL不同浓度大蒜素和99μL不完全培养基(大蒜素组,终浓度分别为5、10、20、40、80mg生药/mL),5列分别加1μL不同浓度的大蒜素和99μL4μM盐酸厄洛替尼(联合给药组)。孵育24h or 48h,吸弃原培养基,每孔加100mLPBS洗一次,加100μL不完全培养基和10mL MTT。
4. 工作计划
2022.01 皮疹动物模型造模预实验
2022.02-2022.03 HaCaT细胞实验
2022.03-2022.05 皮疹动物造模及大蒜素给药,后期数据处理
5. 难点与创新点
本实验采用盐酸厄洛替尼对小鼠进行皮疹造模,考察大蒜素对皮疹的防治作用,建立了分子靶向药物所致皮疹动物模型,从而有效防治EGFR抑制剂所致的皮疹。
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