1. 研究目的与意义
课题研究内容1.研究转BT玉米对亲代大鼠淋巴细胞亚群（CD3 、CD45R 、CD4 、CD8 、TCR αβ 、TCR γδ ）的影响。
2.研究转BT玉米物对亲代大鼠血清中细胞因子IL-4、IL-6、IL-13、IL-10、IL12-p70、IFN-γ、IL-5、MCP-1、TNF-α表达水平的影响。
课题研究意义通过观察大鼠免疫细胞亚群及细胞因子的变化，了解转基因作物对陆生模式动物是否具有免疫毒性。
2. 文献综述
转BT作物及其免疫毒性评价摘要：BT基因即是苏云金芽胞杆菌基因，因其表达产物BT毒蛋白杀虫效果好、安全、高效等优点而成为应用最为广泛的转杀虫基因。
BT毒素蛋白为一种细菌蛋白,其分子是由至少三个结构域组成的具有一定空间结构的蛋白质,对于人及其它哺乳动物具有良好的免疫原性。
随着转BT基因烟草、番茄、棉花和玉米相继问世，转BT基因作物得到推广和应用，BT作物的安全性问题也越来越受到重视。
3. 设计方案和技术路线
研究方案亲代（P）SD大鼠（动物来源）随机分为5组，转Bt作物高、低剂量组（分别简称为BtH，BtL），非转基因亲本作物高、低剂量对照组（简称为nBtH，nBtL），商业饲料为空白组（简称为Cont），饲喂不同剂量的转Bt玉米饲料或其非转基因亲本玉米饲料，喂养暴露10周后处死。
大鼠处死前先行眼眶静脉丛取血，EDTA抗凝管收集1ml血浆用于淋巴细胞亚群检测（采用流式细胞术），1.5ml离心管收集1ml血液用于检测血清中细胞因子（包括IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-12p70、IL-13、IFN-γ、TNF-α、MCP-1和 MIP-1β，采用液相芯片法）。
处死后立即解剖，分离脾脏、小肠，进行脾脏单细胞悬液的制备及小肠上皮间淋巴细胞（IELs）的分离纯化。
4. 工作计划
2022.1-2022．2查阅相关文献资料，了解实验有关内容2022.3-2022.4实验操作，数据分析2022.5-2022.6撰写实验论文
5. 难点与创新点
目前，我国转BT基因食品的安全性评价主要集中以亚慢性动物喂养试验为主，试验动物为大鼠，一般情况血液生化和组织病理通常是主要考察指标；而本课题用不同剂量的转BT作物或其非转基因亲本作物饲养大鼠10周，评价BT毒蛋白对其生长发育的毒性效应及靶部位。
对于转基因作物的免疫毒性评价的方法，国际上还未形成明确的实验指南，尚无能100% 检测大多数免疫毒性化合物引起的免疫功能改变的方法。
本课题采用流式细胞术检测外周血、脾脏、IELs的淋巴细胞亚群、采用液相芯片法检测血清中细胞因子，评价转BT玉米的免疫毒性，具有一定的创新性。
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