1. 研究目的与意义
Aurora蛋白激酶家族是一类在细胞增殖起重要作用的丝氨酸/苏氨酸激酶，它们能帮助分裂期的细胞把遗传物质均匀地分配给子细胞。
其中，Aurora B是有丝分裂的关键调节因子，因为它是染色体乘客蛋白复合物（chromosomal passenger complex，CPC）的重要组成部分，而CPC是调节细胞有丝分裂过程中精确性和组织性的一个关键因子。
大量研究证明，Aurora B蛋白激酶与肿瘤的形成有密切关系，其过表达会引起中心体的扩增、多倍体的形成以及 p53 的缺失。
2. 文献综述
Aurora B蛋白激酶及其抑制剂研究综述韩晓梅（南京中医药大学 江苏南京 210000）摘 要:Aurora蛋白激酶家族是一类在细胞增殖过程起重要作用的丝/苏氨酸蛋白激酶，在人体中有 Aurora A、Aurora B 和 Aurora C 三个家族成员。
Aurora 蛋白激酶参与细胞有丝分裂过程，其异常表达会损害有丝分裂进程，并引起遗传不稳定性，最终导致细胞癌变。
目前研究发现 Aurora蛋白激酶在多种肿瘤细胞中高度表达，并参与了这些肿瘤的发生发展。
3. 设计方案和技术路线
研究方案：我们采用的宿主菌为大肠杆菌，采用的培养基为LB培养基。
前期我们通过Docking分子对接技术初步预测了几个影响小分子与Aurora B蛋白结合的关键氨基酸位点并将其突变，后构建质粒载体并将其导入到宿主菌中，得到突变菌种。
大批量培养时，按1%接入种子液量，同时加入1000的氨苄（500），然后放入37℃，180rpm的摇床养菌2-2.5h后接入1000IPTG诱导剂（500）在16℃，180rpm的条件下摇菌20h，然后用5000rpm离心收菌，使用超声破碎仪或细胞破碎仪，破菌后在12000rpm条件下离心30min，去沉淀，取上清后过0.45μm的滤膜，得到全菌液。
4. 工作计划
1月2日进组1.21.30进行野生型和突变体菌种的大批量培养，离心收菌，存于-80℃2.172.28培养PP酶和Tev酶，并进行野生型及部分突变型表达蛋白的纯化3.13.31 PP酶、Tev酶以及剩余突变体菌种表达蛋白的纯化4.14.30将纯化后的浓缩蛋白进行MST测定5-6月 撰写论文以及答辩
5. 难点与创新点
先前研究表明小分子A对Aurora B具有一定的抑制活性，通过本课题研究可以进一步确定小分子A与Aurora B蛋白结合的具体氨基酸位点，并为确定小分子A的靶点是否确实为Aurora B蛋白提供证据。
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