1. 研究目的与意义
缺血性脑卒中（Ischemic Stroke, IS）是一种常见的急性脑血管疾病，具有高发病率、高死亡率以及高致残率的特点，成为临床上亟待解决的难题。
由于治疗时间窗口非常有限，故大多数缺血性脑卒中患者都未能得到及时有效的治疗，迫切需要更深入的理解致病分子机制，开发积极的预防和治疗方法，以减少脑卒中损伤。
在前期研究工作中，本课题组率先报道了从野生黑枸杞果实中制备纯化的花色苷类单体成分对于缺血性脑卒中损伤具有显著的保护作用（Zihao Pan et al., Frontiers in neuroscience, 2018）。
2. 文献综述
黑枸杞花色苷对SH-SY5Y细胞OGD模型炎症损伤的改善作用及其机制研究2015级生物制药本科 李玉华【摘要】 脑缺血是以脑循环血流量减少为特征的脑血管疾病，发病率占卒中的70% ～ 80%。
然而花色苷的健康益处似乎有几种信号通路以及一些关键的细胞过程，如细胞周期，细胞凋亡，自噬和生化代谢，可以为将来改善脑缺血提供潜在的治疗靶点和策略。
目前研究脑缺血的在体损伤及保护作用的报道很多，但由于在体动物的种族和个体差异以及对缺血手术的反应性千差万别，使一些药物研究的结果很不稳定，不利于药物作用的正确评估，因此利用稳定的细胞模型来研究，无论对损伤机制的探讨，还是药物的作用机制研究和评估，都十分有利。
3. 设计方案和技术路线
1、实验体系的构建（1）SH-SY5Y细胞的培养、传代和保藏（2）SH-SY5Y细胞的诱导分化（3）SH-SY5Y细胞 OGD模型的构建与评价（4）黑枸杞花色苷给药浓度和给药时间的考察2、黑枸杞花色苷对SH-SY5Y细胞OGD模型炎症损伤的改善作用（1）细胞存活率检测：CCK-8法（酶标仪）（2）炎症相关因子表达水平检测：ELISA法（酶标仪）3、黑枸杞花色苷对SH-SY5Y细胞OGD模型炎症损伤改善作用的机制研究（1）NF-κB信号通路中关键蛋白表达水平和磷酸化水平检测：Western blot法
4. 工作计划
2022年1-2月：查阅文献，熟悉课题，撰写综述，复苏、培养、传代和冻存细胞。
2022年3月：诱导分化细胞，构建和评价糖氧剥夺模型。
2022年4月：考察黑枸杞花色苷的给药浓度和给药时间，并评价其对SH-SY5Y细胞OGD炎症损伤的改善作用。
5. 难点与创新点
黑枸杞果实具有良好的药用价值，是我国西北地区少数民族使用的一种民族药，被誉为荒漠中的软黄金和黑珍珠，经济价值和开发潜力巨大。
黑枸杞果实中含有非常丰富的花色苷类成分，在前期工作中本课题组采用具有自主知识产权的组合柱色谱技术从黑枸杞果实中纯化和鉴别了2种单体成分，并率先报道了上述花色苷单体成分对于缺血性脑卒中损伤具有显著的保护作用。
本毕业设计是在前期工作上进一步从抵抗炎症的角度考察黑枸杞花色苷对缺血性脑卒中保护作用的分子机制，研究内容尚未见于文献报道，具有一定的创新性。
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