1. 研究目的与意义
内容：纤维二糖脱氢酶（Cellobiose dehydrogenase,CDH）(EC 1.1.99.18)是一类黄素血红素蛋白，它是一种胞外酶[1，2]，该酶主要由一些可降解木质纤维素的丝状真菌合成[3-5]。
CDH的分子质量大约是90kDa，其中氨基酸占80kDa，剩下的10kDa是糖基，且多是甘露糖。
CDH是一种单节显性的酶，有两个独立的基团：黄素基团含焦磷酸化酶(FAD)、血红素基团含细胞色素b型血红素。
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2. 文献综述
【摘要】：纤维二糖脱氢酶（CDH）是由木腐真菌产生的胞外酶，本实验以粗糙脉孢菌菌株2489产生的CDH进行研究。
CDH只在纤维素存在的条件下才会表达，而当以葡萄糖和纤维二糖为底物时，检测不到CDH活性。
粗糙脉孢菌菌株2489基因组中有两个潜在的CDH基因序列（cdh-1、cdh-2），通过在cdh-1、cdh-2基因前分别插入强启动子，使CDH能在葡萄糖或纤维二糖培养条件下表达，实验室已获得这两株工程菌。
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3. 设计方案和技术路线
1孢子液的制备。
2粗酶液的制备。
3纤维二糖脱氢酶酶活的测定。
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4. 工作计划
2022年2月28号2022年3月15号：孢子液与粗酶液的制备2022年3月16号2022年3月21号：纤维二糖脱氢酶酶活的测定2022年3月22号2022年3月30号：碳源的优化后不同碳源条件下wtCDH、2489-cdh1和2489-cdh2的酶活比较2022年4月1号2022年4月20号：纤维二糖脱氢酶的分离与纯化2022年4月21号2022年4月30号：结果分析及数据整理
5. 难点与创新点
国内外关于CDH的研究多集中以白腐菌为产生菌，国内关于CDH的纯化很少有人研究。
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