一个水稻脆杆突变体hsp表型分析及精细定位开题报告

 2023-02-10 16:13:54

1. 研究目的与意义、国内外研究现状(文献综述)

本课题的意义水稻是最重要的粮食作物之一,是世界60%人口的主食。

近10余年来,由于水稻单产徘徊不前,人口不断增长,耕地面积持续减少,水稻生产正面临着越来越大的压力,迫切需要进行水稻种质材料的创新。

水稻茎秆的机械强度作为水稻重要的农艺性状,直接与水稻的产量、抗倒伏性相关。

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2. 研究的基本内容和问题

研究目标对水稻脆杆突变体hsp进行表型分析并精细定位该基因的的位置,为研究细胞壁合成的调控机制和水稻茎秆强度性状的改良做好前期准备。

研究内容1.对一个水稻脆杆突变体hsp进行表型分析2.利用已经构建的9311/N22和9311/TC65F2群体对一个脆杆突变体进行精细定位;拟解决的关键问题本文就以一个脆杆突变体为研究对象,重点实现一个脆杆突变体的鉴定和基因的精细定位。

3. 研究的方法与方案

研究方法(1) 表型鉴定对F2群体表型进行考察,将脆茎表型的极端个体分单株取叶片。

(2) 基因定位 利用SDS方法提取叶片DNA, 用公用标记筛多态,用10个极端个进行连锁分析,开发新标记,扩大群体进行精细定位。

1.DNA提取1.1将选取叶片剪碎于2mlPE管中,加入钢珠并用液氮冷冻,用磨样机打碎 ;1.2在PE管中分别加入SDS 600μL 65℃水浴30min; 1.3加入ph值4.8的KAC 150ul冰浴30min;1.4加入600ul氯仿:异戊醇(24:1)溶液,振荡器上震荡30min,充分摇匀;1.5离心,12000rpm,5min,转移200ul上清液于新1.5ml的PE管中;1.6向上清液中加入2倍体积(400ul)-20℃冰箱冷冻20min的无水酒精;1.7弃无水乙醇,风干,加200ul ddH2O溶解,此为DNA母液;1.8将母液稀释10倍即为DNA工作液。

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4. 研究创新点

特色或创新之处水稻茎秆的机械强度作为水稻重要的农艺性状,直接与水稻的产量、抗倒伏性相关。

脆杆突变体表现为水稻茎秆机械强度降低,其形成主要与细胞壁的合成有关。

本研究以一个脆杆突变体hsp为研究材料,通过9311/N22和9311/TC65 两个F2群体进行基因定位,hsp是一个遗传背景稳定、受隐形基因控制的水稻脆茎突变体,表型分析发现这可能是一个控制水稻脆茎新的基因。

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5. 研究计划与进展

实验研究计划1.2014年7月-9月:进行DNA提取、PCR、SSR标记凝胶电泳等基本实验操作的学习,阅读相关文献,为后期基因定位做准备。

2.2014年10月-12月:取定位群体中极端个体的叶片,进行DNA提取和SSR标记凝胶电泳,连锁分析及初定位。

3.2015年1月-3月:进行基因的精细定位。

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